UV分光光度計(jì)的不同測(cè)量模式選擇
UV分光光度計(jì)可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求來選擇測(cè)試模式,儀器提供的測(cè)試模式有“波長(zhǎng)掃描”、“時(shí)間掃描”、“定點(diǎn)測(cè)量”、“定量測(cè)量”、“核酸測(cè)量”和“蛋白質(zhì)測(cè)量”幾種,我們依次來看看:
一、波長(zhǎng)掃描
主要用以檢測(cè)樣品對(duì)一定范圍波長(zhǎng)光的吸收情況,以便對(duì)樣品進(jìn)行定性測(cè)量。
1.點(diǎn)擊左側(cè)主功能欄中的“波長(zhǎng)掃描”即可進(jìn)入波長(zhǎng)掃描界面。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測(cè)參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測(cè)光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點(diǎn)擊“基線測(cè)量”以扣除空白的背景吸收。
5.將檢測(cè)光路中的空白溶液換成待測(cè)樣品。
6.點(diǎn)擊“掃描”。以完成樣品波長(zhǎng)掃描檢測(cè)。
7.點(diǎn)擊“保存”并選擇保存路徑即可保存譜圖。
注意:在“基線測(cè)量”中所選擇的基線必須與參數(shù)設(shè)置中基線一致!
二、時(shí)間掃描
是檢測(cè)樣品在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)吸光度(或透過率)隨時(shí)間的推移而發(fā)生變化情況,主要用以檢測(cè)樣品的穩(wěn)定性或進(jìn)行化學(xué)動(dòng)力學(xué)研究。
1.點(diǎn)擊左側(cè)主功能欄中的“定量測(cè)量”即可進(jìn)入定量測(cè)量界面。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測(cè)參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測(cè)光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點(diǎn)擊“基線測(cè)量”以后扣除樣品空白的背景吸收。
5.將檢測(cè)光路中的空白溶液換成待測(cè)樣品。
6.點(diǎn)擊“掃描”以完成樣品波長(zhǎng)掃描檢測(cè)。
7.點(diǎn)擊“保存”并選擇保存路徑即可保存譜圖。
三、定點(diǎn)測(cè)量
是檢測(cè)樣品在特定波長(zhǎng)中的吸光度(或透過率)。
1.點(diǎn)擊左側(cè)主功能欄中的“定量測(cè)量”即可進(jìn)入定量測(cè)量界面。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測(cè)參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測(cè)光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點(diǎn)擊“自動(dòng)校零”,以扣除該波長(zhǎng)中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測(cè)光路中的空白溶液換成待測(cè)樣品。
6.點(diǎn)擊“測(cè)量”,以完成樣品的吸光度(或透過率)的測(cè)量。
7.點(diǎn)擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測(cè)量結(jié)果。
四、定量測(cè)量
可通過檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品或輸入特定的系數(shù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線后測(cè)量樣品的濃度值。
1.點(diǎn)擊左側(cè)主功能欄中的“定量測(cè)量”即可進(jìn)入定量測(cè)量界面。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測(cè)參數(shù)并輸入標(biāo)樣的濃度值。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測(cè)光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點(diǎn)擊“自動(dòng)校零”,以扣除該波長(zhǎng)中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測(cè)光路中的空白溶液換成標(biāo)樣,點(diǎn)擊“標(biāo)樣測(cè)量”讀取標(biāo)樣的吸光度值。
6.所有標(biāo)樣測(cè)量完畢后,將光路中的標(biāo)樣換成待測(cè)樣品,點(diǎn)擊“樣品測(cè)量”進(jìn)行樣品測(cè)量。
7.點(diǎn)擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測(cè)量結(jié)果。
五、核酸測(cè)量
1.點(diǎn)擊左側(cè)主功能欄中的“核酸測(cè)量”即可進(jìn)入核酸測(cè)量界面。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測(cè)參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測(cè)光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點(diǎn)擊“空白”,以扣除該波長(zhǎng)中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測(cè)光路中的空白溶液換成待測(cè)樣品,點(diǎn)擊“測(cè)量”得到230nm、260nm、280nm和320的吸光度值同時(shí)計(jì)算出A260/A280、A260/A230和樣品濃度。
6.點(diǎn)擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測(cè)量結(jié)果。
六、蛋白質(zhì)測(cè)量
1.點(diǎn)擊左側(cè)主功能欄中的“蛋白質(zhì)測(cè)量”即可進(jìn)入蛋白質(zhì)測(cè)量界面。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測(cè)參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測(cè)光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點(diǎn)擊“空白”,以扣除該波長(zhǎng)中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測(cè)光路中的空白溶液換成待測(cè)樣品,點(diǎn)擊“測(cè)量”,儀器會(huì)按照設(shè)定好的計(jì)算方式和濃度計(jì)算方法計(jì)算出濃度。
6.樣品測(cè)量完畢后,點(diǎn)擊“結(jié)束”生成結(jié)果文件。
7.點(diǎn)擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測(cè)量結(jié)果。